DSpace Collection: MAESTRIA EN CIENCIAS EN INGENIERIA BIOQUIMICAMAESTRIA EN CIENCIAS EN INGENIERIA BIOQUIMICAhttps://rinacional.tecnm.mx/jspui/handle/TecNM/15672024-03-29T14:48:37Z2024-03-29T14:48:37ZProducción de celulasas de Aspergillus niger ITV-02Miranda Sosa, Alejandrahttps://rinacional.tecnm.mx/jspui/handle/TecNM/26052021-10-08T05:08:11Z2019-06-14T00:00:00ZTitle: Producción de celulasas de Aspergillus niger ITV-02
Authors: Miranda Sosa, Alejandra
Description: Las celulasas son enzimas que hidrolizan enlaces (1→4)-β-D-glicosídicos de celulosa, liquenina y β-D-glucanos y por ello tienen diversos usos tales como: en la producción de alimento para ganado, en la industria textil, en la industria alimentaria y en la producción de bioetanol de segunda generación para la hidrólisis de residuos lignocelulósicos, sin embargo, el alto costo de las celulasas es una de las principales barreras económicas para lograr la factibilidad del proceso. Debido al posicionamiento del bioetanol como bioenergético y el impacto económico que tiene el uso de enzimas altamente eficientes en este proceso. El presente tiene como objetivo establecer las mejores condiciones para la producción de celulasas de Aspergillus niger ITV-02 a partir de residuos lignocelulósicos. Los resultados obtenidos mostraron que el rastrojo de maíz fue el sustrato que produjo un extracto enzimático con mayor actividad celulolítica respecto a los otros sustratos probados (bagazo de caña, bagazo de sorgo, cáscara de arroz y paja de cebada), esto pudo deberse a que el rastrojo de maíz fue el sustrato que tuvo un mayor porcentaje de deslignificación (83%), lo que permitió que la estructura lignocelulósica fuera más porosa y accesible para A. niger ITV-02 favoreciendo la producción de celulasas. Al evaluar el efecto de la inoculación del microorganismo se encontró que las condiciones más favorables para la producción de celulasas fueron cuando se inocularon las esporas directamente al medio de fermentación y no con previa adaptación. De igual forma, el efecto de la concentración de sustrato a 10, 20 y 30 g/L mostró que la mejor producción de celulasas se logra con 10 g/L de rastrojo de maíz, 3.5 veces más que con 30 g/L. Finalmente se llevó a cabo la optimización de la producción de celulasas utilizando un modelo Box Behnken evaluando el efecto de la temperatura, el pH y la agitación, siendo la variable de respuesta la actividad celulasa total (FPU/mL). Las condiciones óptimas obtenidas fueron: 33°C, pH= 5.3 y 200 rpm, obteniendo un extracto enzimático con una actividad celulasa total de 0.215 FPU/mL, 1.6 veces más que el valor obtenido en la producción de celulasa antes de la optimización. Por lo que se concluye que A. niger ITV-02 es una cepa potencial para la producción de celulasas, utilizando un sustrato con alto contenido de celulosa y bajo contenido de lignina, como lo es rastrojo de maíz, el cual puede actuar como inductor para la producción de celulasas.2019-06-14T00:00:00ZEfecto del silenciamiento del gen Tomlox B en la producción de etileno en tomate (Solanum lycopersicum ) var. TA234Velázquez López, Arturo Albertohttps://rinacional.tecnm.mx/jspui/handle/TecNM/25732021-09-22T17:49:38Z2017-05-01T00:00:00ZTitle: Efecto del silenciamiento del gen Tomlox B en la producción de etileno en tomate (Solanum lycopersicum ) var. TA234
Authors: Velázquez López, Arturo Alberto
Description: El tomate (Solanum lycopersicum) es una de las hortalizas más importantes en
México y el mundo. Una gran parte de la comercialización de este fruto es en forma
fresca y durante su vida post-cosecha se suceden a lo largo de la cadena productiva,
importantes pérdidas. Extender la vida de útil de frutos ha sido el objeto de
numerosas investigaciones, basadas en la expresión y medición de la actividad de la
ACC oxidasa (ACCO) y poligalacturonasa (PG) principalmente, las cuales son
reguladas por el etileno (C2H4). La lipoxigenasa (LOX) cataliza la incorporación de
oxígeno molecular en los ácidos grasos poliinsaturados; su actividad está
relacionada con la síntesis de compuestos volátiles y con la perdida de firmeza de los
frutos durante la maduración del mismo; sin embargo, no se ha estudiado la relación
entre la expresión del gen (TomloxB) y la producción de Etileno, así como su
participación en el proceso de maduración del fruto. Por lo anterior, se propuso
analizar el efecto del etileno sobre la actividad de la lipoxigenasa, cuyos objetivos
fueron a) Evaluar el efecto del silenciamiento del gen Tomlox B sobre la producción
de C2H4 durante la maduración de frutos de tomate (Solanum lycopersicum) var.
TA234, b) Evaluar la administración de C2H4 exógeno sobre la actividad de LOX y
ACCO en frutos silenciados con el gen TomloxB, y c) Cuantificar la expresión de los
genes que codifican para las enzimas ACCO, ACC sintasa, TomloxA, TomloxB,
TomloxC, con y sin aplicación de C2H4 exógeno. Para alcanzar dichos objetivos se
cosecharon los frutos en tres estados de maduración (quebrando, rayado y rosado).
Se midió la actividad de LOX, ACCO y el nivel de expresión de Tomlox A,B,C, ACCO
y ACCS; posteriormente se aplicó etileno exógeno y se midieron las mismas
variables de respuesta. Los datos obtenidos muestran que el silenciamiento del gen
ii
TomloxB provocó una reducción de la producción de etileno y un retardo en la
aparición del pico climatérico, el cual se presentó en el día 6 y 8 (frutos en estado
quebrando), mientras que los frutos silvestres mostraron este pico en el día 2.
El silenciamiento del gen TomloxB produjo un decremento en la síntesis de la
enzima LOX, así como los productos de esta; con esto la actividad de la ACCO se
redujo, tanto en el estado quebrando como en el estado torneado, pero no en el
estado rosado. Además, debido a que la LOX se encontró en menor cantidad, la
membrana celular se halló más integra, lo que generó menor pérdida de etileno
generado por la célula y menor interacción con el etileno externo, ya sea por la
presencia de una cantidad excesiva de frutos o por administración exógena. El
etileno desencadena una serie de reacciones que activa a ACCO. El nivel de
expresión de los genes estudiados fue variado: en frutos sin etileno exógeno en
estado quebrado y torneado mostró una reducción en los tratamientos, mientras que
en el estado rosado no hubo diferencia significativa. Al aplicar etileno exógeno se
sobre-expresaron algunos genes (TomloxA, ACCO y ACCS), los cuales son
positivamente regulados por el etileno, mientras que las TomloxB y TomloxC
mostraron una disminución en el estado quebrado. En los demás estadios obtuvieron
una sobre-expresión, por lo tanto, la presencia de las enzimas lipoxigenasas,
específicamente TomloxB, es necesaria para el proceso de maduración del fruto
debido a que está relacionada con la enzima ACC oxidasa la cual sintetiza etileno.2017-05-01T00:00:00ZEvaluación de la actividad antiinflamatoria de sistemas nanoestructurados formulados con postbióticos obtenidos de bacterias ácido-lácticas específicas utilizando un modelo de inflamaciónValera Molina, Lady Christiamhttps://rinacional.tecnm.mx/jspui/handle/TecNM/25722021-09-22T17:43:59Z2019-12-06T00:00:00ZTitle: Evaluación de la actividad antiinflamatoria de sistemas nanoestructurados formulados con postbióticos obtenidos de bacterias ácido-lácticas específicas utilizando un modelo de inflamación
Authors: Valera Molina, Lady Christiam
Description: La exposición excesiva a la radiación UV provoca la inflamación de la piel aumentado el riesgo de padecer cáncer. . Por esta razón, el objetivo de este trabajo fue evaluar in vivo el potencial efecto antiinflamatorio de sistemas nanoestructurados preparados con postbióticos utilizando un modelo de inflamación inducida por irradiación UV. Para la obtención de postbióticos (contenido intracelular) y pared celular, se utilizaron 3 bacterias con potencial probiótico (Lactobacillus pentosus J24, Lactobacillus fermentum J20, Enterococcus faecium E16) y 3 cepas probióticas (Lactobacillus paracasei casei subsp. paracasei 431, Lactobacillus casei Shirota; Bacillus coagulans BC30). Se seleccionaron aquellos postbióticos con mejores propiedades antioxidantes y antiinflamatoria in vitro. Finalmente, se desarrollaron y caracterizaron sistemas nanoestructurados formulados con los postbióticos seleccionados previamente y se evaluó in vivo su potencial actividad antiinflamatoria empleando un modelo murino que recibió un proceso de radiación con luz UVB. De acuerdo a los resultados de los ensayos in vitro, el contenido intracelular de Lb. fermentum J20 mostró la mayor (p<0.5) actividad antioxidante y antiinflamatoria, por lo que fue seleccionado para la formulación de los sistemas nanoestructurados. El sistema de nanoemulsión (5% de fosfatidilcolina, 20% de amplitud) con postbióticos preparados con cuatro ciclos de trabajo produjo el menor tamaño de partícula (107.6 nm). En el modelo in vivo, no se observaron cambios significativos en la actividad antioxidante, pero los grupos que fueron tratados con el postbiótico, NG con postbiótico, y protector solar presentaron menor actividad en los mediadores (óxido nítrico, y actividad de lipoxigenasa) evaluados en muestras de tejido, con respecto al testigo positivo (únicamente recibió la radiación UVB). Adicionalmente, las citocinas,proinflamatorias, IL-12p70, TNFα, IFNᵞ y la citocina reguladora IL-10 no mostraron diferencia significativa entre los diferentes tratamientos. En contraste, para IL-6 se encontró que el tratamiento con NE c/postbiótico fue menor que el testigo (+), además de un incremento significativo para mCP-1. Los resultados obtenidos en el presente trabajo permitieron demostrar la posible aplicación tópica del sistema nanoestructurado con el contenido intracelular de Lactobacillus fermentum J20 al reducir mediadores de inflamación y la citocina proinflamatoria IL-6 y por su actividad antioxidante2019-12-06T00:00:00ZEvaluación de la capacidad de consorcios microbianos para reducir la disponibilidad de acrilamida (AA) en un modelo digestivo simulado.Torres Gregorio, Margaritahttps://rinacional.tecnm.mx/jspui/handle/TecNM/25712021-09-22T17:36:09Z2018-01-01T00:00:00ZTitle: Evaluación de la capacidad de consorcios microbianos para reducir la disponibilidad de acrilamida (AA) en un modelo digestivo simulado.
Authors: Torres Gregorio, Margarita
Description: La acrilamida (AA), es un xenobiótico dietario con potencial efecto neurotóxico, genotóxico y carcinogénico. Estudios in vitro han evaluado la capacidad de bacterias probióticas específicas para reducir la biodisponibilidad de la AA como estrategia para mitigar sus efecto tóxicos. Sin embargo, dichos estudios no han considerado que, a nivel intestinal, estas bacterias co-existen con otras especies bacterianas propias de la microbiota nativa, de las cuales se desconoce el papel que podrían desempeñar como modelo biológico de descontaminación de AA. Es por ello que el objetivo de este trabajo fue determinar las posibles interacciones de consorcios conformados por cepas probioticas específicas y/o cepas representativas de la microbiota nativa, de la primera porción del intestino delgado, para fijar acrilamida en un sistema digestivo simulado. Para ello primero se evaluó la capacidad individual de fijación de AA de 10 cepas probióticas (CP) y 6 cepas nativas del duodeno (CND) bajo diferentes condiciones, a saber; tiempo de exposición a la AA (4 y 12 h), fase de crecimiento bacteriano (exponencial, estacionaria), concentración de AA (5 y 10 μg/mL) y pH del medio de reacción (5 y 7). A partir de estos ensayos se seleccionaron las mejores condiciones para evaluar la capacidad de fijación de AA de tres consorcios (CP, CND y CP+CND). Finalmente, dicha capacidad de fijación fue evaluada en un sistema digestivo simulado.En general, los resultados mostraron que las cepas evaluadas presentaron una mayor capacidad (p>0.05) de fijación de AA en fase de crecimiento estacionaria con un tiempo de exposición a AA de 12 h y una concentración de 5 μg AA/mL. Entre las bacterias probióticas, B. coagulans, L. casei Shirota, L. fermentum JB3 y L. pentosus JB4, exhibieron el mayor porcentaje de fijación de AA (80-87%). Mientras que, entre las bacterias de la flora nativa, fueron S. salivarius, B. catenolatum y S. gallolyticcus (ca. 68%). Por lo tanto, estas bacterias fueron seleccionadas para la conformación de los consorcios. Ambos consorcios (CP y CP+CND) constituidos con bacterias probioticas mostraron mayor (p>0.05) capacidad de fijación (>90 %) que las bacterias individuales, mientras que el CND mostró menor (p>0.05) capacidad de fijación (60 %). Este mismo comportamiento se observó en condiciones gastrointestinales simuladas. Estos resultados sugieren que los consorcios formados por cepas probióticas específicas podrían desempeñar un papel importante en la reducción de la disponibilidad de acrilamida a nivel intestinal.2018-01-01T00:00:00Z