DSpace Collection:https://rinacional.tecnm.mx/jspui/handle/TecNM/4002024-03-28T10:47:53Z2024-03-28T10:47:53ZMetabolismo de óxido nítrico en Mucor circinelloidesOrtiz-Corza, Diego%933824https://rinacional.tecnm.mx/jspui/handle/TecNM/32882022-04-01T20:25:39Z2021-01-15T00:00:00ZTitle: Metabolismo de óxido nítrico en Mucor circinelloides
Authors: Ortiz-Corza, Diego%933824
Description: El óxido nítrico (NO) es un radical diatómico que ha demostrado participar en procesos de importancia biológica en diversos organismos vivos. Sin embargo, en hongos los detalles sobre su biosíntesis y eventos que regula no son conocidos, pero la evidencia vincula al NO con el crecimiento de hifas, patogénesis y producción de esporas.
Un estudio previo permitió identificar en el genoma de M. circinelloides, posibles homólogos para los genes de la nitrato reductasa (NiaD) de Aspergillus niger y la óxido nítrico sintasa (NOS) de animales, involucrados en la asimilación de nitrógeno y producción de NO, respectivamente. El marco de lectura abierto de dichos genes se interrumpió y se obtuvieron las mutantes ΔMunr y ΔMuNosΔMunr.
Este trabajo dio continuidad a la anterior investigación para entender el metabolismo y función de NO en M. circinelloides.
Se ha identificado mediante bioinformática, una secuencia cuya proteína predicha podría tratarse de GSNO reductasa, que participa en el proceso de eliminación de NO. Se llevó a cabo la caracterización morfológica de las cepas ΔMunr y ΔMuNosΔMuNr haciendo énfasis en los procesos que presumiblemente son regulados por el NO. Se ha corroborado la producción de NO mediante el reactivo DAF-FM diacetato, que reacciona específicamente con este radical y produce una señal fluorescente.2021-01-15T00:00:00ZPurificación de las lectinas de Vigna unguiculata y su actividad antioxidanteMancera-Castro, Pedro%958449https://rinacional.tecnm.mx/jspui/handle/TecNM/32872022-04-01T20:25:02Z2021-06-01T00:00:00ZTitle: Purificación de las lectinas de Vigna unguiculata y su actividad antioxidante
Authors: Mancera-Castro, Pedro%958449
Description: Las lectinas son proteínas que no son producto de una respuesta inmune, muestran especificidad al unirse a carbohidratos y otras glicoproteínas, de forma libre o enlazados a membranas celulares, causando su aglutinación o precipitación. La aplicación de estas biomoléculas se ha extendido en diversas área de la medicina, inmunología, glicobiología, farmacología, entre otras. Las lectinas pueden ser obtenidas de fuentes vegetales, animales o microbiológicas, entre las más ampliamente utilizadas y estudiadas se encuentran aquellas de origen vegetal, en donde las leguminosas representan una fuente importante de estas moléculas. Sin embargo, las lectinas obtenidas a partir del género Vigna han sido poco estudiadas, como es el caso de la especie Vigna unguicualta (frijol vaquita). Es por ello, que el objetivo del presente trabajo fue realizar la purificación de las lectinas de Vigna unguiculata y evaluar la actividad antioxidante de esta proteína. El frijol fue obtenido del municipio de Tulancingo, Hidalgo; y se determinó dimensiones (largo, ancho y grosor) y contenido de proteína cruda (método Kjeldahl). Las lectinas fueron purificadas por medio de cromatografía de afinidad (matriz fetuína-agarosa) a partir del extracto proteínico obtenido por medio de precipitación por sulfato de amonio; el proceso de purificación fue monitoreado por medio de la cuantificación de la proteína soluble (método de Bradford), absorbancia (280 nm) y la hemaglutinación de eritrocitos humanos A y O. La actividad antioxidante se evaluó con los métodos FRAP y ABTS. Las semillas presentaron un tamaño promedio de 1.08 ± 0.13 cm largo, 0.60 ± 0.06 cm ancho y 0.75 ± 0.05 cm grosor y contienen 22.78 % de proteína. La lectina se logró separar entre las fracciones 54 a 68, alcanzando una actividad especifica de 11906.98 UH/mg con un grado de purificación de 69.30 y rendimiento de 0.44%. La actividad hemaglutinante fue de 512 UH en eritrocitos del grupo A y B. La actividad antioxidante de la lectina (236.9 μmol ET/g) determinada por ABTS, fue 4 veces mayor, en comparación con el extracto proteínico (58.7 μmol ET/g) y 5 veces superior a la mostrada por la harina (48.6 μmol ET/g), mientras que con el método de FRAP la lectina no mostró actividad, debido posiblemente a las condiciones de pH del medio que al parecer afectan la actividad de la lectina, sin embargo, la harina presentó 10.7 μmol ET/g y el extracto proteínico 8.3 μmol ET/g. Este estudio presenta la base para una posterior caracterización bioquímica y de estabilidad a diferentes agentes fisicoquímicos y enzimáticos, así como su posible aplicación en el área biológica y médica.2021-06-01T00:00:00ZExtracción de acetogeninas de la semilla de Annona muricata en condiciones supercríticas utilizando CO2 como disolvente y etanol como co-solventeCordova-Espiritu, Rubén Ricardo%958569https://rinacional.tecnm.mx/jspui/handle/TecNM/32862022-04-01T20:24:21Z2021-05-01T00:00:00ZTitle: Extracción de acetogeninas de la semilla de Annona muricata en condiciones supercríticas utilizando CO2 como disolvente y etanol como co-solvente
Authors: Cordova-Espiritu, Rubén Ricardo%958569
Description: La búsqueda de soluciones alternativas a la medicina para tratar y/o curar enfermedades como el cáncer, ha sido un tema de gran relevancia en los últimos años, siendo los compuestos fitoquímicos una de estas alternativas de mayor interés. Algunos compuestos bioactivos se han encontrado en los frutos, cáscara, semillas y hojas de la guanábana (Annona muricata), en particular, las acetogeninas. Actualmente las acetogeninas producidas por A. muricata, son un tema de estudio de gran interés en el campo de la medicina y de la investigación de terapias alternativas. El objetivo de este trabajo, fue extraer acetogeninas de la semilla de A. muricata utilizando CO2 en condiciones supercríticas con co-solvente etanol y comparar los resultados con el método tradicional (Soxhlet) usando etanol. Para ello se necesitó desengrasar la harina de semillas de guanábana, la cual se usó en ambos procedimientos. Para la extracción usando CO2 en condiciones supercríticas constó de 5 tratamientos; 1er tratamiento: extracción de acetogeninas de la harina de semilla de guanábana sin desengrasar, 2do tratamiento: extracción de acetogeninas de la harina de semilla de guanábana sin desengrasar con etanol como co-solvente, 3er tratamiento: extracción de acetogeninas de la harina de semilla de guanábana desengrasada, 4to tratamiento: extracción de acetogeninas de la harina de semilla de guanábana desengrasada, sometida a sonicación en etanol y utilizando etanol como co-solvente, y 5to tratamiento: extracción de acetogeninas de la harina de semilla de guanábana desengrasada con etanol como co-solvente. De los cuales los tratamientos 4 y 5 resultaron ser los más favorables para la obtención de acetogeninas. Para la extracción de acetogeninas con el método tradicional, primero se desengrasó la harina de semilla de guanábana usando hexano, posteriormente la harina desengrasada se procesó en el equipo Soxhlet utilizando etanol como disolvente para extraer acetogeninas, estos ensayos se realizaron por triplicado. Además, se determinó la cantidad de acetogeninas (ACGs en adelante) que se extraen en conjunto con las grasas. Para la cuantificación de acetogeninas, se utilizó el reactivo de Kedde, el cual reacciona con los anillos α-β-insaturados o -lactona saturado, resultando en una coloración rosa, se midió la absorbancia en un espectrofotómetro a una longitud de onda de 505 nm. Los resultados obtenidos demostraron que por medio de la extracción usando CO2 en condiciones supercríticas se obtuvo mayor rendimiento en concentración de acetogeninas (4to tratamiento: 3.8492 mg ACGs/mL de extracto, el cual corresponde a 1.6736 mg ACGs/g de harina de semilla con cáscara desengrasada; 5to tratamiento: 9.9108 mg ACGs/mL de extracto, que corresponde a 5.7454 mg ACGs/g de harina de semilla con cáscara desengrasada) en comparación con los resultados obtenidos por extracción con el método soxhlet usando etanol como disolvente (1.2874 mg ACGs/mL de extracto, correspondientes a 0.2639 mg ACGs/g de semilla desengrasada). En cuanto a la determinación de acetogeninas del extracto oleoso de la semilla se obtuvo que se encuentran en cantidad de 0.0400 mg ACGs/mL de extracto, correspondientes a 0.5990 mg ACGs/g de grasa de harina de semilla con cáscara. Se concluyó que la extracción de acetogeninas con CO2 en condiciones supercríticas facilita y mejora hasta 21 veces la extracción de acetogeninas, lo cual es un factor determinante para estudios posteriores de extracción limpia de este compuesto bioactivo.2021-05-01T00:00:00ZAnálisis de la función de los genes ROS1 (Repressor Of Silencing 1) y SPL12 (Squamosa Promoter-binding protein-like 12) durante el desarrollo de la semilla en Amaranthus hypochondriacusGarduño Tamayo, Yunuen Quetzali%933860https://rinacional.tecnm.mx/jspui/handle/TecNM/8342021-03-11T20:17:48Z2020-12-01T00:00:00ZTitle: Análisis de la función de los genes ROS1 (Repressor Of Silencing 1) y SPL12 (Squamosa Promoter-binding protein-like 12) durante el desarrollo de la semilla en Amaranthus hypochondriacus
Authors: Garduño Tamayo, Yunuen Quetzali%933860
Description: El amaranto o Amaranthus es un género de plantas herbáceas y anuales perteneciente a la familia Amaranthaceae, que comprende más de 70 géneros y aproximadamente 80 especies. Hasta ahora se ha reportado que Amaranthus hipochondriacus cuenta con 12.9% de proteínas, y concentraciones elevadas de lisina aproximadamente 6.1g/ 100 g de proteína; aminoácido esencial que está en baja proporción en otros cereales, lo cual confiere al amaranto un alto valor nutricional. Dicha característica y debido a los cambios en los hábitos alimenticios de la población, permiten centrar la atención al estudio del grano de amaranto. Para este cultivo no existen estudios detallados en los que se describan los mecanismos genéticos y moleculares que regulan el desarrollo de la semilla, por lo cual en el presente trabajo se tiene como objetivo estudiar la función de ROS1 (Represor of silencing 1) y SPL12 (Squamosa Pormoter Like 1) en Amaranto, los cuales desempeñan una función importante durante el desarrollo de la semilla Arabidopsis thaliana y a su vez regulan a diversos genes como DEMETER encargado de llevar a cabo la desmetilación de las primeras etapas de la formación de la semilla.
En este trabajo, se analizó la expresión relativa del gen AmROS1 y AmSPL12 mediante análisis de RT-PCR tiempo real en diferentes tejidos. Tépalo y óvulo antes de fecundación presentaron mayor expresión de ambos genes AmROS1 y AmSPL12, lo cual sugiere que ambos podrían ser determinante en las etapas de diferenciación del gametofito femenino y por lo tanto de la semilla de Amaranto, así como que estos podrían estar relacionados. Una vez que se determinó la expresión de AmROS1 y AmSPL12, para realizar un estudio detallado de las etapas y células donde se expresan, se diseñó una sonda de hibridación, la cual clonó en el vector pGEM®-T Easy y se utilizara para el análisis de hibridación in situ.
Para el análisis de función el gen AmROS1, se decidió realizar una construcción para la sobreexpresión de AmROS1 mediante la clonación en el vector pBin35S, el cual contiene el promotor constitutivo 35SCaMV. Para esto, se obtuvo el cDNA de AmROS1 y AmSPL12 para su sobreexpresión en plantas de Arabidopsis thaliana y de esta manera analizarlo durante el desarrollo de la semilla. Además, una vez que se tenga la línea sobreexpresante de AmROS1 y AmSPL12, se analizará la expresión del gen DEMETER para estudiar su regulación por AmROS1.2020-12-01T00:00:00Z