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Título : DENTIFICACIÓN DE HIDROLASAS PEPTIDOGLUCANO PRODUCIDAS POR Pediococcus acidilactici ITV-26 y Limosilactobacillus fermentum SP-23
Autor : López Zamudio, Amairany
metadata.dc.subject.other: HIDROLASAS, Pediococcus acidilactici ITV-26, Limosilactobacillus fermentum SP-23
Fecha de publicación : 2020-06-11
Editorial : Tecnológico Nacional de México
metadata.dc.publisher.tecnm: Instituto Tecnológico de Veracruz
Descripción : Las hidrolasas de peptidoglucano (PGH), son enzimas involucradas en diversas funciones celulares, hidrolizan de manera controlada los enlaces del peptidoglucano, clasificándose en N-acetilmuramidasas, N-acetilglucosaminasas, N-acetilmuramoil-L- alanina amidasas y en peptidasas. Estas enzimas son secretadas mediante la vía general de secreción (sec) o mediante el sistema de translocación doble de arginina (TAT) y tienen pesos moleculares de 27 kDa a 137 kDa. Su importancia radica en su potencial uso como compuestos bactericidas, que inhiben el crecimiento de bacterias de importancia en salud pública. El objetivo de este trabajo fue identificar las PGH producidas por Pediococcus acidilactici ITV-26 y Limosilactobacillus fermentum SP-23 aisladas de quesos frescos artesanales y heces de neonato. Para ello se realizó la identificación fenotípica y genotípica de las bacterias en estudio, mediante cinéticas de crecimiento y enzimáticas se determinó la fase de crecimiento con mayor actividad de PGH, a partir de proteínas extracelulares, de citosol y adheridas a membrana, posteriormente, se determinó el peso molecular de las proteínas por electroforesis (SDS-PAGE) y con zimogramas con Micrococcus lysodeikticus ATCC 4698. Las bandas con actividad lítica “in situ” se identificaron mediante secuenciación de péptidos. Los resultados mostraron una identidad molecular >98 % con Pediococcus acidilactici y Limosilactobacillus fermentum, la mayor actividad enzimática de PGH fue en las proteínas adheridas a membrana, a las 14 h para Pediococcus acidilactici ITV- 26 y a las 16 h en Limosilactobacillus fermentum SP-23. Se identificaron bandas con actividad lítica con pesos moleculares de 23 kDa (SP-23) y 25 kDa (ITV-26) la cual coincide con una endopeptidasa ATP dependiente, que no ha sido reportada en la hidrólisis del peptidoglucano. La actividad observada de endopeptidasa le confiere un gran interés en la industria de alimentos y la biotecnología debido a su potencial utilización para el control de microorganismos patógenos.
metadata.dc.type: info:eu-repo/semantics/masterThesis
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